大腸桿菌大腸菌群檢測(cè)試劑盒操作步驟及適用樣本？

南京信帆生物供應(yīng)大腸桿菌大腸菌群檢測(cè)試劑盒，操作簡(jiǎn)單方便，適用于食品及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù)，如消毒牛乳、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測(cè)，也可用于表面的衛(wèi)生檢測(cè)。

1、原理及適用范圍 

大腸桿菌（Escherichia coli）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血?jiǎng)游锬c道和糞便的細(xì)菌，是條件性致病菌，主要造成水體污染，也可能引起食物中毒的發(fā)生。大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片（FilmplateTM E.coli&coliform count plate BE203）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，可以同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總的大腸菌群數(shù)。

本產(chǎn)品適合于食品及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù)，如消毒牛乳、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測(cè)，也可用于表面的衛(wèi)生檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸桿菌計(jì)數(shù)——Petrifilm^TM 測(cè)試片法（GB/T 4789.38）。 

2、操作方法 

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液，依次往下稀釋。 
 

2.2、接種：一般食品選1～2個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開(kāi)上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 
 

2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。 

3、結(jié)果判讀 

培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總大腸菌群數(shù)。

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 

4.1、選擇菌落數(shù)在15～150個(gè)之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。 

4.2、若兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均在15～150之間，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每毫升（或每克）樣品中的大腸菌群菌落形成單位數(shù)； 

4.3、如果所有稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)都小于15，則計(jì)數(shù)稀釋度低的測(cè)試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之；如果所有稀釋度的測(cè)試片上均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以低稀釋倍數(shù)報(bào)告之； 
 

4.4、如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于150，計(jì)數(shù)高稀釋度的測(cè)試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。計(jì)數(shù)菌落數(shù)大于150的測(cè)試片時(shí)，也可計(jì)數(shù)一個(gè)或兩個(gè)具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個(gè)方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20（濾紙區(qū)面積為20cm²），即為測(cè)試片上估算的菌落數(shù)。報(bào)告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。 

5、附加說(shuō)明 

5.1、樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，必要時(shí)用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調(diào)節(jié)pH。 

5.2、我國(guó)的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)大多都以大腸菌群（Coliform）作為檢測(cè)指標(biāo)，而歐盟等許多國(guó)家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測(cè)對(duì)象，因此，本產(chǎn)品對(duì)于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應(yīng)用前景。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，好在拆封前將整包回溫至室溫。

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