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UNchained UNcle 高通量蛋白穩(wěn)定性分析儀

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品介紹：美國Unchained高通量多功能蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle是得到蛋白分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、聚集穩(wěn)定性、膠體分散穩(wěn)定性等多種類型數(shù)據(jù)的設(shè)備

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品介紹：

美國Unchained 高通量多功能蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle是得到蛋白分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、聚集穩(wěn)定性、膠體分散穩(wěn)定性等多種類型數(shù)據(jù)的設(shè)備。該設(shè)備既能使用經(jīng)典方法處理數(shù)據(jù)，又新增多種分析模式；既可獲得單一類型數(shù)據(jù)，又可對多種類型數(shù)據(jù)同時(shí)測定整合分析；既保證了數(shù)據(jù)質(zhì)量，又實(shí)現(xiàn)了數(shù)據(jù)種類和通量；并且樣品用量少，操作簡單快捷，更能夠解決蛋白樣品數(shù)據(jù)獲得過程中的問題。以此近期多篇利用該設(shè)備得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果高質(zhì)量文獻(xiàn)發(fā)表。

一、產(chǎn)品參數(shù)

1. 基于內(nèi)源性熒光、動(dòng)態(tài)光散射和靜態(tài)光散射原理；

2. 可測定Tm（變性溫度）；

3. 可測定Tagg（聚集起始溫度）；

*4. 可測定Sizing（蛋白顆粒直徑即粒度）和PDI（分散度）；

*5. 可測定B22(第二維里系數(shù))、kD（擴(kuò)散系數(shù)）；

*6. 可一次測定1~48個(gè)viscosity（黏度）；

7. 可測定ΔG（吉布斯自由能變）和ΔG Trend（自由能改變趨勢）；

8. 可用于研究蛋白Isothermal stability（等溫穩(wěn)定性）、Thermal recovery（熱恢復(fù)實(shí)驗(yàn)）；

*9. Tm值計(jì)算模型可采用350/330比值法、曲線下面積法、質(zhì)心波長法以及發(fā)射峰法4種方法計(jì)算；

10. 依據(jù)蛋白內(nèi)源性的芳香族氨基酸的熒光改變測定Tm時(shí)，無需添加化學(xué)染料；

11. 也可根據(jù)蛋白具體需求添加特異性蛋白染料如ANS， SYPRO Orange等；

12. 不同樣品/制劑條件在獨(dú)立樣品池中封閉檢測，不存在交叉污染的可能；

*13. 粒度檢測范圍：0.3-1000 nm；

14. 可測定蛋白樣品濃度范圍：50 µg/ml ~150 mg/ml（以IgG為例）；

*15. 一次可同時(shí)測定1~48個(gè)樣品，每個(gè)樣品≤9 uL；

16. 溫度控制范圍：15℃-95℃；

*17.升溫速度0.01-10℃每分鐘；

18. 溫度控制精度0.01℃；

*19. 配有270nm~720nm全光譜高靈敏CCD；

*20.配備266nm、473nm和660nm三根激光器；

21. 配備簡單易用的操作軟件和功能強(qiáng)大的分析軟件；

22. 儀器無需要定期更換的配件，實(shí)驗(yàn)完成后不需要對儀器進(jìn)行清洗維護(hù)；

二、儀器設(shè)備工作原理

（1）工作原理

采用蛋白分子中芳香族氨基酸內(nèi)源性熒光檢測蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性（Tm），蛋白分子變性過程中，其結(jié)構(gòu)逐漸打開（unfold），疏水結(jié)構(gòu)域逐漸暴露于水性環(huán)境，包埋于疏水位點(diǎn)的芳香族氨基酸其熒光發(fā)射屬性改變，從而可以得到蛋白變性曲線，定量計(jì)算出Tm；采用靜態(tài)光散射（SLS）技術(shù)檢測蛋白聚集穩(wěn)定性，蛋白變性過程中，其結(jié)構(gòu)逐漸打開，疏水位點(diǎn)逐漸暴露，達(dá)到一定程度（溫度）時(shí)，蛋白分子開始聚集，導(dǎo)致散射光信號增加，從而確定蛋白聚集起始溫度。此外，采用動(dòng)態(tài)光散射（DLS）進(jìn)行粒度及粒度分布分析，黏度分析以及膠體分散穩(wěn)定性分析（B22和kD）。

（2）與傳統(tǒng)方法的分析

現(xiàn)有蛋白/抗體/疫苗穩(wěn)定性檢測技術(shù)及方法主要包括：孵箱法結(jié)合分子排阻層析（SEC）、PCR技術(shù)（染料法）、DSC技術(shù)和DSF技術(shù)（染料法）。（1）孵箱法結(jié)合分子排阻層析（SEC）。通常將孵箱設(shè)置為30~40℃，將候選蛋白/抗體/疫苗分子及/或不同制劑配方放置于孵箱中，定期取樣觀察/檢測，基于終點(diǎn)法檢測，應(yīng)用極為普遍，可以稱之為“金標(biāo)準(zhǔn)”，但工作量大，任一個(gè)候選藥物分子或者制劑配方均需要多份重復(fù)，以便不同時(shí)間取樣檢測；并且該方法時(shí)間周期較長，通常需要半年或更久；樣品用量較大。（2）PCR技術(shù)基于染料法檢測蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，通常采用SYPRO Orange，蛋白在加熱過程中逐漸變性，疏水結(jié)構(gòu)域逐漸暴露，熒光染料與蛋白疏水結(jié)構(gòu)域結(jié)合并且熒光發(fā)射屬性改變，尤其獲得蛋白變性曲線，可定量計(jì)算出蛋白變性溫度（Tm）。該方法優(yōu)點(diǎn)為通量較高，蛋白用量少，檢測成本低。但隨著技術(shù)進(jìn)步，該方法在工業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用逐漸被替代，其缺點(diǎn)主要為基于蛋白染料檢測，間接檢測方式，蛋白變性過程中染料基于疏水作用與蛋白吸附，這種相互作用存在影響蛋白變性過程的可能，從而導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。（3）DSC技術(shù)在蛋白/抗體穩(wěn)定性分析中比較經(jīng)典，可定量測定蛋白變性溫度和變性起始溫度，工業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用廣發(fā)。但是該方法存在樣品用量大（130uL，26ug）、通量低（一次實(shí)驗(yàn)1個(gè)樣品，24小時(shí)全自動(dòng)化僅能分析50個(gè)樣品）；單一樣品池，存在交叉污染可能。（4）DSF技術(shù)最初應(yīng)用于PCR為代表的染料法，近幾年也逐漸摒棄染料，采用類似UNcle的檢測方法，即基于蛋白芳香族氨基酸的內(nèi)源性熒光，也能做到高通量和多參數(shù)，樣品微量化。但其存在的缺點(diǎn)也非常明顯，Tm檢測數(shù)據(jù)分析模型單一，僅僅依賴于比值法（350nm/330nm），聚集穩(wěn)定性分析技術(shù)薄弱，沒有粒度分布分析、黏度分析、膠體分散穩(wěn)定性分析。等溫穩(wěn)定性分析等等。此外，以上所有技術(shù)或方法均存在檢測參數(shù)單一的問題，而生物大分子穩(wěn)定性分析及其制劑開發(fā)需要多方面檢測，包括結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性分析，聚集穩(wěn)定性分析，膠體分散穩(wěn)定性分析，粒度分布分析，黏度分析等等。UNcle高通量多參數(shù)蛋白穩(wěn)定性檢測與制劑開發(fā)系統(tǒng)具備所有以上特征，同時(shí)兼具高通量、樣品微量化特點(diǎn)，可成倍提升工作效率。

三、儀器設(shè)備在國內(nèi)外使用情況

UNchained Labs是一家、也是目前一家專注于開發(fā)并提供蛋白/抗體穩(wěn)定性分析以及生物制劑配方篩選與評價(jià)工具與解決方案的公司；UNchained Labs公司擁有的工業(yè)與行業(yè)監(jiān)管用戶，包括美國食品（FDA）、美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）、亞力兄制藥（Alexion），百時(shí)美施貴寶（Bristol Myers Squibb），禮來（Eli Lilly），基因泰克（Genentech），吉利德（Gilead），葛蘭素史克（GlaxoSmithKline），諾華（Novartis），輝瑞（Pfizer），羅氏（Roche），賽諾菲（Sanofi），安進(jìn)（Amgen），雅培（Abbott），艾伯維（AbbVie），拜耳（Bayer），楊森（Janssen），龍沙（Lonza），默克（Merck）等；國內(nèi)用戶包括中檢院、百奧泰、綠葉制藥、恒瑞研發(fā)、蘇州信達(dá)、康寧杰瑞、德思特力、華博生物、強(qiáng)生中國研發(fā)中心、寶船生物、上海腫瘤研究所、蘇州大學(xué)、清華大學(xué)、中國計(jì)量、舒泰神、義翹神州、軍科華仞、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)等。裝機(jī)超過150套，國內(nèi)超過20套。

四、儀器設(shè)備與同類儀器設(shè)備的比較分析（提供不少于三家國內(nèi)外廠商同類型儀器設(shè)備性能、價(jià)格比較）；

蛋白穩(wěn)定性檢測與制劑開發(fā)系統(tǒng)主要型號的性能參數(shù)對比

序號	產(chǎn)品	技術(shù)參數(shù)內(nèi)容	產(chǎn)品	其次產(chǎn)品	第3產(chǎn)品
	型號		UNcle	Prometheus NT.48	NanoDSC
	廠商		Unchained Labs	Nano Temper Technologies	TA
	主要指標(biāo)參數(shù)
1	★	2. 可測定Tm；	√√√	√	√√√
2	▲	3. 可測定Cm、ΔG、Tagg；	√√	√	X
3	▲	7. 對測定緩沖液條件無限制，可測定在去垢劑環(huán)境中的膜蛋白；	√	√	√
4	▲	9. 配備蛋白聚集檢測模塊；	√√√	√	X
5	▲	10.可測定蛋白樣品濃度范圍：下限≤100 µg/ml ，上限≥ 200 mg/ml；	可測定蛋白樣品濃度范圍：50µg/ml - 150 mg/ml √	可測定蛋白樣品濃度范圍：5 µg/ml – 250 mg/ml √√	可測定蛋白樣品濃度范圍：100 µg/ml – 2 mg/ml X
6	▲	11. 一次可同時(shí)測定≥48個(gè)樣品，每個(gè)樣品≤10 uL；	一次可同時(shí)測定48個(gè)樣品，每個(gè)樣品9uL √√	一次可同時(shí)測定48個(gè)樣品，每個(gè)樣品10 uL √	一次可測定1個(gè)樣品，每個(gè)樣品130 uL X
7	▲	14. 可獲得高分辨率數(shù)據(jù)，每個(gè)樣品1分鐘內(nèi)可獲得≥100個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)；	全光譜掃描，每個(gè)樣品1分鐘內(nèi)可獲得＞1000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn) √√√	每個(gè)樣品1分鐘內(nèi)可獲得10個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)X	每個(gè)樣品1分鐘內(nèi)可獲得10個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn) √
8	▲	15. 24小時(shí)可測定≥1000個(gè)樣品；	24小時(shí)可測定大于1000個(gè)樣品√	24小時(shí)可測定最多1000個(gè)樣品√	24小時(shí)可測定最多50個(gè)樣品 X
9	▲	16. 配備粒度及黏度分析模塊	√√√	X	X
10	▲	17. 一次實(shí)驗(yàn)48個(gè)樣品可同時(shí)分析Tm、Tagg及粒度	√√√	X	X
11	▲	18. 光譜掃描及數(shù)據(jù)分析；	270nm~720nm全光譜掃描，Tm值4種分析模型√√√	330nm及350nm雙波長檢測，Tm值一種分析模型350/330 X	X
12	▲	19. 可隨意選擇label-free檢測方式或labeled檢測方式，兼容非染料法和染料法；	√√√	X	X
13	▲	20. 配備3支激光器；	3支激光器，266nm用于靜態(tài)光散射和內(nèi)源性熒光激發(fā)，473nm用于靜態(tài)光散射和染料激發(fā)，660nm用于動(dòng)態(tài)光散射粒度檢測和黏度、B22、kD檢測√√√	X	X
14	▲	21. 原廠技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)確保售后質(zhì)量和服務(wù)連續(xù)性；	亞太總部位于上海，原廠團(tuán)隊(duì)服務(wù)√√√	臨時(shí)代理商，隨時(shí)有終止代理協(xié)議可能X	原廠團(tuán)隊(duì)服務(wù)√√√
15	▲	22. 國內(nèi)用戶基礎(chǔ)；	＞150家用戶，國內(nèi)＞15家用戶√√√	國內(nèi)無制藥用戶X	＞100家用戶，國內(nèi)至少10家用戶√√√